轮状病毒减毒活疫苗感染性滴度一步法RT-qPCR检

目的建立型别特异性一步法反转录实时荧光定量聚合酶链反应检测方法,用于多价轮状病毒疫苗的鉴别和效力评价。方法针对G1、G2、G3、G4、G9型轮状病毒设计引物探针,优化反应温度和条件,使用轮状病毒疫苗株培养后收获液进行特异性、线性和范围、重复性检测,评估该反应体系的性能。结果各型别之间无交叉反应,其他肠道病毒阳性标本未见特异性扩增曲线。每个型别的稀释倍数和Ct值的线性决定系数均>95%。每个型别各浓度梯度同一检测日内和不同检测日间的变异系数均<15%,并且差异均无统计学意义(P=0.917、0.746)。结论该方法特异性、线性和范围、重复性都符合检测要求,可用于多价轮状病毒疫苗的鉴别和效力评价。

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