感染性疾病及传染病论文_结核分枝杆菌抗原Rv2
文章摘要:目的：随着卡介苗的保护效应日趋减弱，以及结核分枝杆菌耐药株的广泛存在，全球尚缺乏控制结核病的有效疫苗，全球结核病发病率和病死率仍然较高。本研究旨在分析结核分枝杆菌抗原Rv2654重组蛋白在诱导小鼠细胞免疫和体液免疫应答中的作用，评价其作为抗结核病候选疫苗的潜力。方法：在细菌的对数生长期加入诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-beta-D-thiogalactoside,IPTG）诱导细菌表达Rv2654重组蛋白，用亲和层析纯化，蛋白质印迹法鉴定Rv2654重组蛋白。采用ELISA方法检测不同人群血清与Rv2654重组蛋白的免疫反应性。以Rv2654重组蛋白免疫昆明小鼠，采用细胞因子磁珠阵列法检测小鼠外周血Th1/Th2类细胞因子水平，并以流式细胞术分析小鼠脾T、B淋巴细胞亚群分布。结果：成功表达Rv2654重组蛋白，以Rv2654重组蛋白作为抗原的ELISA结果显示其与卡介苗接种者或活动期结核患者血清均有反应性。Rv2654重组蛋白免疫小鼠可促进小鼠外周血IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10等多种细胞因子表达（均P<0.05），流式细胞术结果显示Rv2654重组蛋白可显著刺激CD4+T细胞和CD8+T细胞分化为效应T细胞，这种作用在联合卡介苗应用时更为明显，Rv2654重组蛋白也能刺激小鼠B细胞活化增殖并向记忆细胞分化。结论：Rv2654重组蛋白可诱导小鼠的细胞免疫应答，而且与卡介苗接种者和活动性肺结核患者血清有较好的结合能力，有望作为结核病免疫学预防和诊断类疫苗的候选抗原。
文章关键词:
