畜牧与动物医学论文_体外TLR3配体增强鸭坦布苏
文章摘要:为了阐明TLR3配体对鸭坦布苏病毒（DTMUV）灭活苗的免疫增强作用，以TLR3配体poly（I:C）和灭活DTMUV作用雏鸭外周血单个核细胞（PMBC），通过体外检测TLR3相关信号蛋白和细胞因子转录及表达水平，明确TLR3配体发挥免疫增强作用的主要信号通路。制备雏鸭PMBC，选择TLR3配体poly（I:C）与灭活DTMUV的不同组和与雏鸭PBMC相互作用，通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和间接ELISA方法对细胞因子（IL-6）和干扰素（α-IFN、β-IFN、γ-IFN）的mRNA转录水平和蛋白表达水平进行测定，结果显示各细胞因子和干扰素的mRNA转录水平和蛋白表达均升高。通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR对TLR3相关信号蛋白（TLR3、TRIF、MyD88、NF-κB）的mRNA转录水平测定，结果显示TLR3、TRIF的mRNA转录水平升高显著，MyD88的mRNA转录水平升高不明显。抑制NF-kB的试验组，细胞因子和干扰素mRNA的转录水平显著降低，可见，NF-κB对poly（I:C）+灭活DTMUV组细胞因子和干扰素的产生发挥重要的调节作用。TLR3配体poly（I:C）通过与TLR3结合，激活了TRIF-NF-kB通路，从而引起细胞因子和Ⅰ型干扰素的产生。
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