生物学论文_表达O型口蹄疫病毒衣壳蛋白的重组

文章摘要:研究表明，口蹄疫病毒（FMDV）衣壳蛋白前体P1-2A含有FMDV主要抗原决定簇，并在3C蛋白酶的裂解下表达FMDV衣壳蛋白，可诱导机体产生高水平的体液免疫应答。为了研究FMDV衣壳蛋白对鼠体内体液免疫应答的影响，本研究构建了含有O型FMDV P1-2A-3C基因的重组腺病毒表达载体，鉴定后将正确的质粒通过细菌内同源重组的方式构建了重组腺病毒rAdV-P12A3C。结果显示成功获得rAdV-P12A3C。将rAdV-P12A3C连续传至第8代，分别利用IFA和Western blot检测第2、4、6、8代rAdV-P12A3C外源基因在293细胞中的表达。结果显示，获得了表达FMDV P1-2A-3C基因的rAdV-P12A3C，且外源基因在病毒传代过程中能够稳定表达。测定rAdV-P12A3C的病毒效价并绘制一步生长曲线。结果显示，该rAdV-P12A3C传至第8代时，毒价可达7.2×10⁸ TCID₅₀/mL，表明外源基因插入后对重组腺病毒的病毒滴度未造成明显影响。将rAdV-P12A3C免疫4组BALB/c鼠，对BALB/c鼠进行采血并制备血清，通过间接ELISA方法检测鼠体内的抗体。结果显示，rAdV-P12A3C接种BALB/c鼠后7周（二免后3周）IgG抗体达到峰值，之后抗体水平逐渐下降，到第24周抗体水平接近阴性，表明rAdV-P12A3C能够刺激BALB/c鼠体内产生IgG抗体。上述研究结果表明：rAdV-P12A3C能够表达FMDV衣壳蛋白，并能在鼠体内产生高水平的体液免疫应答，为新型口蹄疫候选疫苗研究奠定了一定的基础。

文章关键词:

论文分类号:S852.65

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