畜牧与动物医学论文_壳聚糖兽用疫苗稀释液的制

文章目录

1 材料与方法

1.1 疫苗

1.2 主要试剂

1.3 实验动物

1.4 壳聚糖稀释液的制备

1.5 壳聚糖稀释液最佳浓度筛选

1.6 壳聚糖稀释液对山羊痘活疫苗安全及效力影响的检测

1.7壳聚糖稀释液对猪瘟疫苗（细胞源）安全及效力影响的检测

1.8 统计学分析

2 结果

2.1 壳聚糖稀释液的制备

2.2 壳聚糖稀释液的最佳浓度

2.3 壳聚糖稀释液对山羊痘活疫苗安全及效力的影响

3 讨论

文章摘要:目的建立一种壳聚糖稀释液的制备方法,并制备一种生物相容性较好、安全性高、可有效提高疫苗免疫效果的兽用疫苗稀释液,以用于草原牧区大规模动物免疫。方法在酸性条件下溶解壳聚糖,向上清中滴加NaOH使已溶解的可溶壳聚糖析出,制备再生壳聚糖。用不同pH的0.2 mol/L磷酸-柠檬酸缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液和磷酸盐缓冲液配制1%～5%的壳聚糖以及再生壳聚糖溶液,并在115℃条件下湿热灭菌。通过溶解特性以及外观等条件筛选最佳缓冲体系。利用不同浓度的可溶壳聚糖稀释液（soluble chitosan diluent,SCD）及再生壳聚糖稀释液（regenerated chitosan diluent,RCD）稀释山羊痘活疫苗,通过免疫山羊后的安全性及ELISA抗体水平筛选最佳稀释液配方,并建立最佳稀释液的制备流程。利用制备的稀释液稀释山羊痘活疫苗及猪瘟活疫苗并免疫动物,检测制备的稀释液的安全性及免疫增强作用。结果筛选得到的最佳稀释液配方及其制备过程为:0.2 mol/L pH 4.0醋酸-醋酸钠缓冲液配制3%浓度的壳聚糖溶液,离心去除杂质后,上清滴加NaOH至沉淀完全析出;收集再生壳聚糖,用0.2 mol/L pH 4.6醋酸-醋酸钠缓冲液配制成2%浓度的再生壳聚糖溶液,115℃湿热灭菌30 min;用1 mol/L无菌醋酸钠溶液调pH至6.0并稀释至终浓度0.5%,即为0.5%pH 6.0的RCD。使用该稀释液配制疫苗,仅免疫1次即可达到其他稀释液配制疫苗免疫2次后的抗体水平,免疫增强作用高于铝胶稀释液,同时具备与生理盐水一致的安全性。结论本研究利用再生壳聚糖制备了性状优良、pH接近中性、生物相容性好的兽用疫苗稀释液。基于壳聚糖良好的抗原吸附及缓释特性,稀释液可在疫苗注射剂量不足的情况下达到理想的免疫效果,较为适合大规模动物免疫时使用。

文章关键词:

论文DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003507

论文分类号:S859.797

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