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中国疫苗和免疫

生物学论文_不同佐剂伪狂犬病病毒主要抗原决定

文章目录

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 毒株及血清

1.3 主要试剂

1.4 gB主要抗原决定簇的表达与鉴定

    1.4.1 引物设计

    1.4.2 重组表达质粒的构建

    1.4.3 gB主要抗原决定簇的原核表达及鉴定

1.5 疫苗的配制

1.6 疫苗免疫昆明小鼠

1.7 临床症状观察与体质量测定

1.8 免疫效力评价

    1.8.1 利用ELISA方法检测疫苗免疫后不同时间体液抗体水平情况

    1.8.2 利用PRV SA强毒株进行攻毒保护力试验

1.9 数据统计分析

2 结果

2.1 目的蛋白的表达与鉴定

2.2 疫苗安全性评价

2.3 小鼠血清抗体测定

2.4 免疫攻毒保护试验

3 讨论

文章摘要:为了评价不同佐剂猪伪狂犬病病毒(PRV)SA株gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠的安全性和免疫效力,以PRV SA强毒株基因组为模板扩增gB基因保守区域,连接pET-28a载体构建pET-28a/gB表达质粒,并经基因测序和Western blot鉴定;制备的抗原与不同佐剂配比分别制备亚单位疫苗,开展不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠免疫效力评估,测定免疫后不同时间体液免疫抗体水平,进行免疫攻毒保护试验,测定免疫保护力。结果表明,不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠后能够产生较高的抗体水平,模式动物昆明小鼠攻毒免疫保护率达到60%,为PRV新型亚单位疫苗的研制提供了依据。

文章关键词:

论文DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.03.03

论文分类号:S852.651

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